在過去的幾十年中,全球科學家一直在研究小GTPases在癌癥中的作用。激動人心的研究結果表明小GTPase能影響多種細胞過程,進而影響癌癥進程,包括細胞骨架動力、細胞周期進程、轉錄調控、細胞存活和囊泡運輸。
我們的Thermo Scientific? GTPase pull-down和檢測試劑盒能夠協(xié)助您的活性和組裝GTPase復合物研究。
這些試劑盒通過選擇性富集G T P a s e 活性形式,實現(xiàn)GTPase活性研究。它們包含了一個GST蛋白結合區(qū)域(PBD)融合,對活性Rho,Ras,Rac1,Cdc42,Rap1或Arf1選擇性結合。不同的下游效應蛋白的蛋白結合區(qū)域表達為GST融合蛋白。固定在谷胱甘肽瓊脂糖樹脂上,蛋白結合區(qū)域會結合細胞裂解液中的活性GTP連接的GTPase。
應用
? 在細胞分化、遷移、分裂和細胞骨架重組中跟蹤小GTPases活性。
? 研究壓力纖維形成過程中GTPase活性
? 監(jiān)控生長因子刺激后活性
? 篩選影響活性小分子抑制因子
我們的活性GTPase拉下和檢測試劑盒提供有效方式,使用時間相關活性分析監(jiān)控GTPase酶功能敏感變化,幫助科學家評估小GTPases在某些疾病,比如癌癥和代謝疾病中的參與度。
每日英雄
Roman Fischer
Roman Fischer博士
英國牛津大學
Thermo Scientific TMT
研究基金2017金級獲獎者
研究領域:Fisher博士領導牛津大學靶點發(fā)現(xiàn)研究所蛋白組部。他的職業(yè)專長涵蓋了從基礎研究項目到臨床新藥物靶點和市場開發(fā)等合作工作,甚至還有古蛋白組。目前Fisher博士和他的團隊關注的是樣品準備方法的篩選,以此來增強使用有限的臨床材料進行深度蛋白組研究靈敏度和效率。
挑戰(zhàn):培養(yǎng)細胞深度蛋白組是很容易獲得的。但是,從有限的生物材料-比如組織部分或某種表型的單個分離細胞(比如通過排列或激光捕獲,顯微切割)-中檢測到>2000蛋白質還是相當困難的,而后者相當接近單細胞蛋白組。
他是如何解決這一困難:Fisher博士和他的團隊使用 Purkinje神經元激光捕獲顯微切割,評估不同樣本準備方法從少量細胞中辨識出最多蛋白的效率。蛋白微珠固定加上后續(xù)消化(SP3方法)獲得的可識別蛋白數(shù)量最多,比標準溶液內消化、FASP和iST方法都要多。
好結果:SP3方法能夠大約從200個Purkinje細胞中檢測出>2500蛋白質。團隊通過把這種方法和串聯(lián)質譜標簽(TMT)試劑和初步組分分離相結合,預期能夠從一個樣本中對不同腦細胞類型進行深度蛋白質檢測和定量分析,從而在細胞精度水平上獲得空間蛋白分析結果。